
判斷BMP6標準品是否仍有效,可通過?外觀初篩+簡化實驗驗證?兩步快速得出結論,核心判定標準如下:
第一步:外觀初篩(快速排除明顯失效)
?未復溶凍干標準品?:凍干塊疏松均勻、無潮解、結塊、變色→外觀合格;如果出現潮解發黃、結塊,說明已經吸潮變質,直接判定失效。
?復溶后的分裝標準品?:解凍后溶液澄清透明、無渾濁絮狀物或沉淀→外觀合格;如果出現沉淀或渾濁,說明蛋白已經變性聚集,直接判定失效。
第二步:簡化實驗驗證(核心判定)
外觀合格后,做簡單預實驗即可確認有效性,滿足?所有以下條件?才判定有效,任意一項不滿足即為失效:
?背景正常?:空白孔平均OD值<0.1,無異常升高;
?梯度顯色正常?:稀釋后的梯度標準品,肉眼能清晰區分顏色梯度,OD值隨濃度升高逐步遞增,無跳點、無平臺異常;
?曲線擬合合格?:四參數邏輯擬合后,標準曲線決定系數?R2≥0.98?,低于0.95說明活性不足,判定無效;
?回收率合格?:檢測已知濃度的質控樣本,結果與理論值偏差<?15%?,超過20%判定無效;
?活性無明顯下降?:和新配制的標準品對比,同濃度下OD值下降不超過?10%?,下降超過30%判定無效。
總結
只要以上驗證全部合格,哪怕分裝后接近6個月,依然可以正常使用;只要任意一項不滿足,即使未到6個月,也不能用于正式實驗。
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